刺激隐核虫α-微管蛋白基因的克隆、原核表达及在生活史不同阶段的mRNA表达
2018-11-15分类号:S941.51
【部门】集美大学水产学院 福建农林大学动物科学学院 莆田市水产科学研究所 福建省水产研究所
【摘要】从本实验室已有刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)转录组数据中筛选获得α-微管蛋白基因片段,利用5’RACE和3’RACE技术首次克隆获得其cDNA,全长为1602 bp,包含1356 bp的开放阅读框,编码451个氨基酸,预测蛋白质分子量为49.78 kD。生物信息学分析表明α-微管蛋白为亲水性非跨膜蛋白,氨基酸序列的第142~148位有特异且保守的GTP核苷酸结合位点(GGGTGSG)。对刺激隐核虫α-微管蛋白氨基酸序列进行同源性比对及进化树分析,发现其与间日疟原虫(Trypanosoma vivax)、丹氏锥虫(Trypanosoma danilewskyi)、八肋游仆虫(Euplotes octocarinatus)、尾刺耐格里原虫(Naegleria gruberi)、眼虫(Euglena gracilis)等的序列一致性高达94%~95%,且在系统进化树上聚为一支。采用实时荧光定量PCR技术对α-微管蛋白基因在刺激隐核虫3个生活史阶段的表达进行检测,结果显示α-微管蛋白基因的表达量在纤毛虫时期显著高于包囊和滋养体时期(P
【关键词】刺激隐核虫 α-微管蛋白 原核表达 生活史 实时荧光定量PCR
【基金】福建省海洋与渔业厅五新项目(201209200023);; 福建省科技厅高校产学合作项目(2017N5002)
【所属期刊栏目】中国水产科学
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