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松材线虫磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1基因的克隆及表达

2018-10-25分类号:S763.18

【作者】王步勇  问荣荣  马玲  周天华  张萌  
【部门】菏泽学院农业与生物工程学院  东北林业大学林学院  
【摘要】应用BLAST比对技术,在松材线虫基因组数据中鉴定得到模式线虫pdk–1的同源基因Bxpdk–1。结合RT–PCR技术进行Bxpdk–1基因完整蛋白编码区(CDS)扩增,得到CDS区全长2298bp。Bx PDK–1蛋白含有"STKc_PDK1""PH_PDK1"2个保守结构域,属于磷酸肌醇激酶超家族。序列比对及进化树分析显示,松材线虫Bx PDK–1蛋白与捻转血矛线虫PDK–1蛋白(CDJ88126.1)同源性为50%,进化树聚在同一小分支上,亲缘关系较近。原位杂交试验表明,Bxpdk–1基因主要在线虫的头部神经元及咽部神经处表达。q PCR结果分析显示,Bxpdk–1基因表达响应鱼藤酮药剂胁迫处理。RNAi试验显示,Bxpdk–1在dsRNA处理12 h时,基因表达量显著下降,基因被沉默。
【关键词】松材线虫  磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1基因  基因克隆  原位杂交  表达分析  RNA干扰
【基金】黑龙江省自然科学基金项目(ZD201404);; 中央高校基本科研业务专项(2572015AA09)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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