夏黑葡萄VlTFL1A基因酵母单杂交文库构建及其上游基因的筛选
2018-08-28分类号:S663.1
【部门】广西壮族自治区农业科学院葡萄与葡萄酒研究所 广西壮族自治区农业科学院
【摘要】【目的】VlTFL1A是葡萄3个TFL基因之一,该基因在葡萄花序形成过程中发挥重要作用。筛选VlTFL1A启动子上游的调控因子,为研究该基因在调控葡萄成花中的机理奠定基础。【方法】由VlTFL1A的启动子构建诱饵融合载体,转化酵母细胞构建诱饵菌株。运用SMART技术构建葡萄酵母单杂交c DNA文库,再共转化诱饵菌株,筛选VlTFL1A启动子上游的调控因子。【结果】筛选出大于500 bp的9个阳性克隆,经测序和Blast同源性分析,作用在VlTFL1A启动子上游的调控因子分别为:信号识别受体亚基、钙调蛋白相关蛋白、转酮醇酶、木葡聚糖糖基转移酶、F-box蛋白、冠毒素不敏感基因1(COI1)、UV-B诱导蛋白、重金属相关的异戊二烯蛋白39等8个蛋白和一个未知功能的蛋白。【结论】筛选出的作用在VlTFL1A启动子上游的9个调控因子在葡萄花序形成过程中的功能尚未见报道,为进一步研究VlTFL1A基因的表达调控机制提供了候选蛋白。
【关键词】VlTFL1A 葡萄 启动子 酵母单杂交 调控因子
【基金】中国博士后科学基金项目“VvTFL1基因在葡萄一年两收二季果成花调控中的作用研究”(2017M613269XB);; 国家自然科学基金项目“葡萄一年两收栽培二次果成花的生理分子机制及调控研究”(31460501);; 广西自然科学基金项目“一年两收栽培模式下葡萄FT基因调控二季果成花的功能及作用机制”(2017GXNSFBA198100)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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