棉花精氨酸酶基因GhARG1 cDNA的克隆与表达分析
2018-08-28分类号:S562;Q943.2
【部门】吉林农业大学生命科学学院 廊坊师范学院生命科学学院 中国人民武装警察部队学院
【摘要】为了深入研究棉花精氨酸酶基因对非生物胁迫的响应以及生理功能,利用电子克隆和RT-PCR技术从棉花中获得了精氨酸酶ORF序列Gh ARG1,盐渍、PEG6000胁迫及ABA、SA和MeJA处理棉花幼苗,并原核表达棉花精氨酸酶基因。生物信息学分析表明,其ORF序列长度为1 023 bp,编码340个氨基酸,具有典型的精氨酸酶保守结构域。q RT-PCR技术分析表明,在叶片中该基因转录水平上受盐渍、PEG6000胁迫及ABA、SA处理的诱导,而对MeJA下调其表达。将Gh ARG1完整的编码序列融合到原核表达载体p Cold-TF中,经过IPTG诱导及SDS-PAGE检测表明,Gh ARG1编码产物的分子量约为37 ku,与预期相符。p Cold-Gh ARG1重组菌粗酶液中精氨酸酶活性是对照菌的6倍。研究表明,棉花内源性精氨酸酶基因Gh ARG1可能通过ABA、SA信号途径参与棉花对盐渍和干旱胁迫的响应,且其克隆表达产物具有精氨酸酶活性,为开展其生理功能研究奠定了基础。
【关键词】棉花 精氨酸酶 非生物胁迫 信号分子 功能鉴定
【基金】河北省自然科学基金项目(C2015408022);; 河北省科技厅重点研发计划项目(17275608);; 河北省遗传学重点发展学科2013年项目;; 廊坊师范学院大学生创新创业计划项目(201610100046)
【所属期刊栏目】华北农学报
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