棘孢木霉葡聚糖酶基因Glu1的克隆及原核表达
2018-07-15分类号:S476
【部门】东北林业大学林学院 黑龙江省林科院森林保护研究所
【摘要】从棘孢木霉(Trichoderma asperellum)ACCC30536中克隆获得一个葡聚糖酶基因Glu1,其cDNA全长984bp,编码327个氨基酸。该葡聚糖酶属于Glyco-hydro-12家族,推测为β-1,4-葡聚糖酶,与深绿木霉IMI 206040的Glycohydro-12家族蛋白(XP_013940397.1)有91%相似性,且亲缘关系较近。运用qRT-PCR技术检测9种诱导条件下棘孢木霉Glu1基因的表达水平,结果表明,Glu1基因能参与棘孢木霉对山新杨(Populus davidiana×P.alba var.pyramidlis)或杨树病原菌的识别。构建原核表达载体并获得重组蛋白rGlu1。酶活特性分析结果表明,该酶最适pH为4.5,最适温度为45℃,且酶活性随诱导时间延长逐渐升高,在5h达到稳定。
【关键词】生物防治 山新杨 序列分析 qRT-PCR 原核表达 酶活特性分析 生物农药
【基金】中央高校基础科研业务费专项基金项目(2572014BA08);; 哈尔滨市科技局青年科技创新人才项目(2013RFQXJ02);哈尔滨市科技局青年科技创新人才项目(2016RQQXJ235);; 黑龙江省级基本科研业务费资助项目
【所属期刊栏目】草业科学
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