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牦牛bta-miR-1434-5p和Smad1基因组织表达谱及荧光素酶报告载体构建

2018-05-15分类号:S823.85

【作者】牛家强  索朗斯珠  徐业芬  王玉恒  商鹏  强巴央宗  郭敏  席广银  赵良栋  
【部门】西藏农牧学院动物科学学院  中国农业大学动物科学技术学院  
【摘要】为探索牦牛Smad1基因与bta-miR-1434-5p是否存在靶向关系,探究bta-miR-1434-5p分子调控可能机制,利用RT-PCR技术对bta-miR-1434-5p和Smad1 mRNA在牦牛组织中的表达谱进行检测,并构建pmiR-RBREPORTTM双荧光素酶报告载体对牦牛Smad1基因3′端非翻译区(3′UTR)与bta-miR-1434-5p的靶向关系进行研究。结果表明:Smad1基因mRNA在牦牛下丘脑、垂体、心、肝、脾、肺、肾、骨骼肌、淋巴结、卵巢、输卵管、子宫组织中均有广泛表达;bta-miR-1434-5p除在牦牛输卵管中没有表达外,在其他组织均与Smad1基因mRNA共表达;获得牦牛Smad1基因3′UTR序列并成功构建野生型及突变型pmiR-RB-REPORTTM双荧光素酶报告质粒;荧光素酶活性检测发现bta-miR-1434-5p mimics对Smad1野生型质粒报告荧光没有明显的下调作用,由此推测btamiR-1434-5p与牦牛Smad1基因的该段3′UTR之间未发现明显互作。
【关键词】牦牛  bta-miR-1434-5p  Smad1基因  组织表达谱  载体构建
【基金】国家自然科学基金项目(31460604);; 中西部高校综合实力提升计划:西藏农牧学院动物遗传育种与繁育学科建设(502000105);; 国家肉牛牦牛产业体系项目(CARS-37)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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