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三七多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的功能分析

2018-04-28分类号:S567.236

【作者】关瑞攀  白智伟  王倩  唐笔锋  崔秀明  刘迪秋  
【部门】昆明理工大学生命科学与技术学院云南省三七资源可持续利用重点实验室  
【摘要】多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)是植物抗病防御系统的重要组成部分。在前期研究中,从三七中分离得到一个编码PGIP蛋白的基因PnPGIP,PnPGIP在转录水平响应三七根腐病菌茄腐镰刀菌的侵染。为深入分析PnPGIP的功能,构建PnPGIP的原核表达载体,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行大量表达,纯化获得PnPGIP的重组蛋白,并进行体外平板抑菌试验;构建PnPGIP的植物超表达载体,通过根癌农杆菌介导产生了PnPGIP转基因烟草,分析T2转基因烟草离体叶片对茄腐镰刀菌的抗性。PnPGIP原核重组蛋白对茄腐镰刀菌、胶孢炭疽菌、核盘菌和轮枝状镰刀菌的菌丝生长具有很强的抑制作用,并且随着蛋白量的增加,抑制活性也逐渐增强。q RT-PCR分析结果显示,PnPGIP在T2转基因烟草中大量表达。此外,与野生型烟草相比,转基因烟草对茄腐镰刀菌的抗性显著增强。PnPGIP是三七中参与茄腐镰刀菌防御反应的重要抗病基因。
【关键词】三七  PGIP  抗性  茄腐镰刀菌  功能验证
【基金】国家自然科学基金项目(81560610);; 云南省应用基础研究计划项目(2014FA003)
【所属期刊栏目】华北农学报
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