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绵羊肺炎支原体多抗原表位基因MO-meAg15重组单增李斯特菌的构建及其免疫原性研究

2017-09-27分类号:S852.4

【作者】卢海亭  乔军  孟庆玲  彭叶龙  田路路  贡莎莎  才学鹏  陈创夫  
【部门】石河子大学动物科技学院  阿克苏地区动物疫病控制诊断中心  中国农业科学院兰州兽医研究所  
【摘要】【目的】本文研发了MO重组活疫苗。【方法】利用PCR技术从LM-SB5株基因组中扩增出rli60基因上下游同源片段a、b,从pMD19-T-meAg15中扩增出MO meAg15目的片段,采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术将扩增得到的3个基因片段融合成ameAg15b,将其克隆测序鉴定。将ameAg15b目的基因亚克隆到pKSV7穿梭载体,构建pKSV7-ameAg15b重组穿梭质粒,将该重组穿梭质粒电转化至LM-SB5感受态细胞,在氯霉素、高温双重压力筛选重组菌LM-Δrli60-ameAg15b
【关键词】绵羊肺炎支原体  单增李斯特菌  meAg15基因  同源重组
【基金】国家自然科学基金项目(31360596);; 国家国际科技合作专项(2014DFR31310);; 兵团中青年科技创新领军人才计划(2016BC001)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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