猪繁殖与呼吸综合征病毒BJ-4株GP4蛋白的原核表达与纯化
2017-03-31分类号:S852.651
【部门】郑州大学生命科学学院 河南师范大学生命科学学院 河南农业大学牧医工程学院
【摘要】【目的】原核表达和纯化猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的结构蛋白GP4,为深入了解其结构和功能奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法扩增PRRSV BJ-4株ORF4基因片段,将其克隆到pMD19-T载体中并进行测序。从测序正确的重组质粒pMD19-T-ORF4中扩增缺失N端及C端疏水序列的基因片段tGP4(truncated GP4),再将其亚克隆到pET-32a载体并转化到大肠杆菌BL21,IPTG进行诱导表达。对表达的重组蛋白进行可溶性分析,使用尿素梯度法进行蛋白纯化,并通过ELISA法检测重组
【关键词】猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP4 原核表达 蛋白纯化
【基金】国家自然科学基金面上项目(31472177)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
文献传递