团头鲂转录因子Nanog的原核表达及其多克隆抗体制备
2017-10-16分类号：Q786;S917.4
【部门】华中农业大学水产学院农业部淡水生物繁育重点实验室 河南师范大学水产学院河南省水产动物养殖工程技术研究中心
【摘要】为深入研究鱼类干细胞多能性转录因子Nanog的功能,本实验进行了团头鲂Nanog基因的原核表达和多克隆抗体的制备。首先,从团头鲂卵巢克隆出Nanog基因的编码区,将其连接到p ET32a载体上构建原核表达载体。接着将重组载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得预期大小的Nanog重组蛋白,并获得大量蛋白以制备抗体。最后通过ELISA检测抗体的效价和采用Western blot技术检测Nanog抗体的特异性。结果显示,在37°C,0.5 mm
【关键词】团头鲂 Nanog 原核表达 多克隆抗体 干细胞
【基金】国家重点基础研究计划(2013CB967700);; 华中农业大学科技自主创新基金(2013RC014,2662015PY049);; 河南省自然科学基金(102300410104);; 河南师范大学青年科学基金(2013qk15);; 河南省水产养殖重点学科资助
【所属期刊栏目】水产学报
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