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解淀粉芽孢杆菌HZ-1510壳聚糖酶基因的克隆、重组表达及其活性

2017-09-05分类号:Q78;Q936

【作者】段静  刘广鑫  董晏君  周洋  李锦铨  刘小玲  周萌  梁日深  赵丽娟  林蠡  
【部门】华中农业大学水产学院  华中农业大学食品科技学院  仲恺农业工程学院动物科技学院  
【摘要】为了研究壳聚糖酶的水解活性,实验进行了解淀粉芽孢杆菌HZ-1510壳聚糖酶基因编码序列的克隆,并构建了谷胱甘肽转移酶(GST)-壳聚糖酶融合蛋白表达质粒,在大肠杆菌中表达后提取、纯化得到重组蛋白,并通过生物信息学对该蛋白的信号肽、三维结构等进行了分析,最后以胶态壳聚糖溶液为底物研究了该重组壳聚糖酶的活性。结果显示,该壳聚糖酶基因的ORF长为837 bp,编码279个氨基酸,分子量为31.45 ku。在其氨基末端具有信号肽,切割点位于36和37位氨基酸之间。氨基酸序列同源性分析表明该壳聚糖酶属于GH46家族
【关键词】解淀粉芽孢杆菌  壳聚糖酶  基因克隆  蛋白表达  酶活性
【基金】湖北省科技支撑计划(2015BBA228);; 武汉市科技局基金(2016020101010089);; 广东省海洋与渔业局基金(2015-033)
【所属期刊栏目】水产学报
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