团头鲂转录因子Oct4的原核表达和多克隆抗体的制备
2018-01-15分类号：S917.4
【部门】华中农业大学水产学院农业部淡水生物繁育重点实验室 河南师范大学水产学院河南省水产动物养殖工程技术研究中心 水产高效健康生产湖南省协同创新中心
【摘要】为进一步分析鱼类干细胞多能性转录因子Oct4的功能,将团头鲂(Megalobrama amblycephala)Oct4进行原核表达并制备了兔抗Oct4多克隆抗体。采用RT-PCR方法从团头鲂卵巢中扩增Oct4基因的部分编码片段,插入载体pET32a中构建重组原核表达载体pET32a-MaOct4;将表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,经IPTG诱导、Ni(2+)亲和柱层析纯化获得分子量约49 ku的可溶性重组蛋白;以纯化的重组蛋白为抗原免疫新西兰兔制备抗体,通过ELISA法测定其效价,We
【关键词】团头鲂 Oct4 原核表达 多克隆抗体 转录因子
【基金】国家自然科学基金(31672653,31771648);; 国家重点基础研究计划(2013CB967700);; 华中农业大学科技自主创新基金(2013RC014,2662015PY049);; 河南省自然科学基金(102300410104);; 河南师范大学青年科学基金(2013qk15)
【所属期刊栏目】上海海洋大学学报
文献传递
