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果梅CCoAOMT蛋白Western-blot体系建立与优化

2017-11-30分类号:S662.4

【作者】张勇  侍婷  吴欣欣  高志红  
【部门】南京农业大学园艺学院  
【摘要】[目的]本文旨在建立一套适合于果梅(Prunus mume)Western-blot的蛋白质提取和技术体系。[方法]以果梅品种‘小绿萼’花芽为试验材料,以咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCo AOMT)为目标蛋白,分别采用Tris-HCl法和SDS上样缓冲液直接提取法,比较2种提取方法的优劣,并通过设置不同的蛋白上样量(20、30、40、50及60μg)、转膜时间(40、60及90 min)、一抗稀释比例(1∶500、1∶1 000、1∶2 000及1∶5 000)以及一抗孵育时间(室温1 h、室温2 h
【关键词】果梅  花芽  蛋白提取  咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCoAOMT)  Western-blot
【基金】国家自然科学基金项目(31500571);; 江苏省自然科学基金项目(BK20150679,BK20151426)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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