密码子优化的猪瘟病毒荧光抗体的表达及初步应用
2017-03-30分类号:S852.651
【部门】南京农业大学动物医学院 国家兽用生物制品工程技术研究中心
【摘要】[目的]本文旨在研究大肠杆菌表达的猪瘟病毒(CSFV)荧光抗体用于病毒直接免疫荧光检测的可行性。[方法]在基因水平上对编码猪瘟病毒纳米抗体(VHH)与绿色荧光蛋白(EGFP)的融合基因进行密码子优化,优化后的融合基因插入p ET32a(+)载体并在大肠杆菌BL21(DE3)中融合表达。表达的融合蛋白经过SDS-PAGE、Western blot进行表达及可溶性鉴定。利用镍柱亲和层析获得纯化的重组蛋白,经浓缩后用于猪瘟病毒直接免疫荧光检测并与CSFV间接免疫荧光试验进行效果比较,将该荧光抗体孵育CSFV、伪
【关键词】CSFV 荧光抗体 原核表达 直接免疫荧光
【基金】江苏省农业自主创新资金专项(CX(15)1026)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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