油桐叶肉细胞原生质体分离及瞬时转化体系的建立
2018-01-15分类号:S794.3
【部门】中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室经济林育种与栽培国家林业局重点实验室
【摘要】【目的】探索油桐叶肉细胞原生质体分离的最适条件,建立油桐原生质体的遗传转化体系,使在油桐体内研究自身基因的功能成为可能。【方法】以油桐成熟叶片和组培苗幼叶为材料,通过酶解法成功分离得到油桐叶肉细胞的原生质体并确定最适分离条件。在此基础上,以获得的原生质体为受体系统,建立PEG介导的油桐原生质体基因转化方法。【结果】原生质体分离结果表明,酶解时间对原生质体产量和活性的影响最大,其次是纤维素酶浓度,而离析酶浓度和甘露醇浓度对原生质体产量和活性的影响较小。以成熟叶片为材料分离原生质体的最适条件为纤维素酶浓度1.
【关键词】油桐 原生质体制备 遗传转化 亚细胞定位
【基金】国家自然科学基金项目(31700600);; “十三五”国家重点研发计划(2017YFD0601304);; 湖南省教育厅资助科研项目(17C1658);; 中南林业科技大学青年科学研究基金(QJ2017002Z);中南林业科技大学林学重点学科开放基金项目(2016YB01)
【所属期刊栏目】林业科学
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