美国白蛾Wnt-1基因的基因组编辑
2017-03-15分类号:S763.42
【部门】国家林业局森林保护重点实验室中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所 中国林业科学研究院华北林业实验中心 中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所昆虫发育与进化生物学重点实验室
【摘要】【目的】为了从分子水平上揭示美国白蛾飞行能力的机制,利用基因组编辑技术对翅形成相关基因Wnt-1进行功能研究。【方法】根据美国白蛾的基因组和转录组信息设计引物,克隆得到HcWnt-1基因CDS区全长,利用在线软件分析HcWNT-1蛋白的结构特征;通过RT-PCR确定该基因在其生长发育过程中的时间表达模式,并通过免疫组化方法确定HcWNT-1蛋白的时空表达模式;通过CRISPR/Cas9技术对HcWnt-1基因进行编辑,观察胚胎期突变体表型和基因型特点,利用直接PCR和阳性克隆测序检测HcWnt-1基因突变
【关键词】美国白蛾 CRISPR/Cas9 Wnt-1 基因组编辑 免疫组化 体节形成 附肢发育
【基金】林业公益性行业科研专项(201504302)
【所属期刊栏目】林业科学
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