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鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2) ORF25蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备

2017-02-13分类号:S941.41

【作者】彭俊杰  张琪  贾路路  林蠡  袁军法  曾令兵  周勇  刘学芹  
【部门】华中农业大学水产学院/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心  中国水产科学研究院长江水产研究所  
【摘要】利用PCR方法扩增鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)ORF25基因的部分基因序列,并将扩增产物连接到原核表达载体pGEX-KG,成功构建了CyHV-2-ORF25-KG重组质粒。IPTG将其诱导后,SDS-PAGE分析表明:目的蛋白得到表达,分子质量大小为42ku,且主要以包涵体形式存在;用纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,多次免疫后通过细胞融合,筛选出1株单抗5C6;经间接免疫荧光试验和Western blot试验验证,这株单抗可以识别CyHV-2ORF25蛋白。
【关键词】鲤疱疹病毒Ⅱ型  ORF25蛋白  原核表达  单克隆抗体
【基金】湖北省科技支撑计划项目(2015BBA234);; 中央高校基本科研业务费专项(2013PY071)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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