灰葡萄孢BcKMO基因的原核表达分析
2017-02-28分类号：S432.44
【部门】河北农业大学真菌毒素与植物分子病理学实验室
【摘要】为构建灰葡萄孢犬尿氨酸单加氧酶(Bc KMO)基因的原核表达载体并进行高效表达,获得纯化的Bc KMO蛋白。以灰葡萄孢野生型BC22为试材,通过反转录PCR扩增Bc KMO基因,回收Bc KMO基因片段克隆到p MD19-T载体中,测序正确后,酶切p MD19-T-Bc KMO和带有GST标签蛋白的p GEX4T-1质粒,将目的片段进行连接,构建Bc KMO基因的原核表达载体p GEX4T-1-Bc KMO-GST。经酶切和测序鉴定正确后,将构建好的原核载体转化大肠杆菌BL21。经IPTG诱导,在大肠杆菌
【关键词】灰葡萄孢 BcKMO 原核表达 纯化 PCR
【基金】河北省高等学校科学技术研究项目(ZD2016001)
【所属期刊栏目】华北农学报
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