藏猪IGF-1成熟肽基因的克隆及原核表达
2017-02-28分类号：Q78;S828
【部门】四川农业大学动物医学院动物微生态研究中心 成都农业科技职业学院
【摘要】旨在克隆藏猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)的成熟肽基因,并进行原核表达的研究。提取藏猪肝脏组织RNA,通过RT-PCR扩增出藏猪IGF-1全长基因,构建重组质粒p MD19-T-IGF-1,以p MD19-T-IGF-1质粒为模板,克隆IGF-1成熟肽序列并构建成熟肽p ET-32α-IGF-1表达质粒,转入大肠杆菌BL21(DE3),对IPTG诱导剂浓度和诱导时间进行优化,Ni-NTA琼脂纯化融合蛋白后采用Western Blot对其鉴定。结果显示,IGF-1成熟肽基因(315 bp),成功构建了成熟
【关键词】藏猪 胰岛素样生长因子1 原核表达 蛋白纯化 蛋白质印迹法
【基金】四川省高等学校科技创新团队资助项目(KM406183.1);; 全国大学生创新训练计划项目(201410626028)
【所属期刊栏目】华北农学报
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