诺丽Actin基因片段克隆及实时荧光定量PCR方法的建立
2018-02-15分类号：Q943.2;S667.9
【部门】西南林业大学园林学院 西南林业大学环境科学与工程学院 北京林业大学生物科学与技术学院
【摘要】为了解决诺丽实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测中无内参基因的现状,根据其他植物Actin基因的保守序列设计一对简并性引物,以诺丽果实总RNA反转录成c DNA为模板,进行PCR扩增,扩增出的基因片段克隆到p MD-18T载体,阳性克隆经PCR鉴定后测序。序列结果表明:该片段长393 bp,编码131个氨基酸;所得序列与麦蓝菜actin 1有最高的一致性(96%)和相似性(98%)。q RT-PCR结果表明,诺丽Actin基因在诺丽的各个组织、果实不同发育时期都能稳定表达,且表达水平基本一致,适合在
【关键词】基因克隆 内参基因 序列分析 表达分析
【基金】云南省自然科学基金(2016FB049);; 中西部高等学校青年骨干教师国内访问学者项目;; 国家林业局推广项目([2015]27)
【所属期刊栏目】中南林业科技大学学报
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