淇河鲫IL-8原核表达系统的构建及多克隆抗体的制备与鉴定
2017-09-15分类号：S917.4
【部门】华南农业大学兽医学院 河南师范大学生命科学学院 河南师范大学水产学院 河南省水产动物养殖工程技术研究中心
【摘要】为揭示淇河鲫(Carassius auratus var.Qihe)白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)的功能,本研究构建了原核表达系统,并制备了兔抗鲫IL-8多克隆抗体。首先采用RT-PCR法扩增淇河鲫IL-8基因编码序列中不含信号肽的基因片段,克隆到pET-32a(+)载体后转化入Rosetta菌株构建原核表达系统。经IPTG诱导表达出相对分子质量约27.8 kD的目标融合蛋白。将纯化的融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,效价达1︰105。经免疫亲和层析纯化的抗体能特异性识别重组和天然的
【关键词】淇河鲫 白细胞介素-8 原核表达系统 多克隆抗体 组织表达 免疫组化
【基金】国家自然科学基金项目(31372545);; 河南省高校科技创新团队支持计划项目(14IRTSTHN013);; 河南省科技计划基金项目(142300410159);; 河南省教育厅科学技术重点研究项目(14A180007);; 河南省自然科学基金项目(162300410165)
【所属期刊栏目】中国水产科学
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