草鱼鳃组织蛋白双向电泳技术的建立及优化
2017-09-15分类号：S917.4
【部门】上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室
【摘要】为建立并优化草鱼鳃蛋白质组双向电泳的技术体系,实验将草鱼鳃经裂解处理后,通过固相p H梯度胶条进行一向等电聚焦和SDS聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳进行蛋白分离,对不同的裂解液配方、蛋白纯化方法、IPG胶条的分离范围、上样量和染色方法等进行了探索和优化,并应用lmage Master 2D Platinum 7.0软件对电泳图谱进行了分析。结果表明:采用裂解液中添加DTT来取代Tris和TBP、选择分离范围为pH4-7的IPG胶条和150μg的主动水化上样,电泳结束后对凝胶进行硝酸银染色,获得了覆盖范围广、低背景
【关键词】草鱼(Ctenopharyngodon idella) 鳃蛋白质 双向电泳 蛋白质组学
【基金】“十二五”国家863计划主题项目(2011AA100403);; 上海高校知识服务平台(ZF1206)
【所属期刊栏目】淡水渔业
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