棉蚜P450 CYP6CY3的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备
2017-03-30分类号：S433.39
【部门】新疆大学生命科学与技术学院/生物资源与基因工程重点实验室 新疆农业科学院农作物品种资源研究所
【摘要】【目的】克隆得到棉蚜(Aphis gossypii)P450 CYP6CY3,将其开放阅读框(ORF)在原核细胞中进行表达,纯化融合蛋白,多次免疫小鼠获得CYP6CY3多克隆抗体,为进一步分析CYP6CY3在棉蚜不同组织部位的分布及其在抗性中的作用打下基础。【方法】利用RT-PCR及3′-RACE技术克隆获得CYP6CY3的ORF,并对其进行生物信息学及系统进化分析。构建重组质粒pET32a-CYP6CY3,转化大肠杆菌transetta(DE3)进行原核表达,利用切胶回收法获得纯化的融合蛋白,继而用纯化
【关键词】棉蚜 CYP6CY3 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体
【基金】国家自然科学基金-新疆联合基金(U1603331);; 新疆自治区青年科技创新人才培养工程(qn2015yx001)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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