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绿盲蝽AlEcR-A的单克隆抗体制备及在外源20E诱导下的应答

2017-01-06分类号:S433

【作者】谭永安  肖留斌  郝德君  赵静  孙洋  柏立新  
【部门】江苏省农业科学院植物保护研究所  南京林业大学林学院  
【摘要】【目的】获得绿盲蝽(Apolygus lucorum)蜕皮激素受体(A1EcR-A)原核表达的重组蛋白,制备单克隆抗体,分析绿盲蝽AlEcR-A在外源蜕皮激素(20E)诱导下mRNA及蛋白表达量的变化趋势,为进一步研究EcR的功能奠定前期基础,同时也为构建20E信号传导的网络图谱提供理论依据。【方法】在前期获得绿盲蝽AlEcR-A的基础上,将含有其基因的T载体经NdeⅠ和XbaⅠ双酶切,构建AlEcR-A原核表达载体(pCzn1-AlEcR-A),将该表达载体经IPTG诱导表达和蛋白Ni-IDA亲和纯化,
【关键词】绿盲蝽  蜕皮激素受体  20-羟基蜕皮酮  单克隆抗体  表达量
【基金】国家科技支撑计划(2012BAD19B05);; 国家自然科学基金(31301668);; 国家现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-18-16);; 转基因棉花环境安全性评价技术(2016ZX08011);; 江苏省农业科学院院基金(611613);; 江苏省农业科技自主创新资金(CX(14)5026)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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